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- # InVivo App - Documentación
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- ## Diseño
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- En esta sección se define cuantos ratones se van a usar, se genera la plantilla para rellenar con las mediciones y también se puede asignar un grupo homogenizando volúmenes.
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- El panel de opciones es el siguiente:
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- ![](images/invivo-8.jpg)
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- - **Hoja de tamaños**: Permite elegir una plantilla con las mediciones basales (día 0 de tratamiento) para la asignación de grupos.
- - **Sistema de medida**: elegir entre "L-W-D", "Min-Max" o "Absorvance" en función de si se usarán tres medidas, dos medidas o directamente la absorvancia, respectivamente.
- - **Cajas**: cuantas cajas (con los consiguientes ratones) se usarán.
- - **Descargar Excel**: botón que sirve tanto para descargar la plantilla vacía como para descargar la plantilla una vez han sido asignados los grupos.
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- 1. Lo primero que se tiene que realizar es elejir el sistema de medida y el número de cajas a utilizar y apretar el botón de "Descargar Excel". Eso descargará una plantilla vacía como la siguiente:
- ![](images/invivo-9.jpg)
- 2. En caso de querer asignar los grupos homogenizando volúmenes, tenemos que introducir en "Hoja de tamaños" un excel con lo siguiente:
- 2.1 Una pestaña con la plantilla en la que se ha rellenado la primera columna temporal:
- ![](images/invivo-10.jpg)
- 2.2 Una segunda pestaña en la que se indica en la primera columna los grupos que se van a usar.
- ![](images/invivo-11.jpg)
- 2.3 Una tercera pestaña (**opcional**) en la que se indica el sexo del animal. Esto permitirá distribuir homogeneamente los sexos entre los grupos.
- ![](images/invivo-12.jpg)
- 3. El siguiente paso es cargar el excel y entonces nos aparecen nuevas opciones en el panel lateral y una distribución de los volúmenes a la derecha.
- ![](images/invivo-13.jpg)
- 4. Las barras en el panel lateral de **Corte inferior** y **corte superior** te permiten excluir aquellos tumores que sean demasiado grandes o pequeños.
- ![](images/invivo-14.jpg)
- 5. La barra **Iteraciones** te permite controlar cuantas iteraciones realizará el programa para encontrar las medias y desviaciones estándar de grupo más homogeneas. Por defecto es 100, que suele ser suficiente.
- ![](images/invivo-15.jpg)
- 6. Una vez esté todo a punto, clicar al botón **Selecciona** y el programa encontrará la distribución más óptima, generando resultados para que podamos verificar si nos convence:
- 6.1 Unos cuantos gráficos dónde podemos ver la distribución de volúmenes entre los diferentes grupos y también comparar entre los diferentes sexos.
- ![](images/invivo-16.jpg)
- 6.2 Una tabla con las medias y desviaciones estándar de los grupos.
- ![](images/invivo-17.jpg)
- 6.3 Una tabla con la asignación individual de los ratones.
- 7. Si la distribución nos convence, podemos seleccionar el botón "Descargar Excel" y nos descargará el fichero que hemos subido ya con los grupos asignados.
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- ## Análisis
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- #### Excel de entrada
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- El excel que debe usarse como entrada para el análisis debe constar de las siguientes columnas:
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- ![](images/invivo-1.jpg)
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- En rojo están marcadas las que definen la muestra y medida y son obligatorias:
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- - **Cage**: Caja
- - **ID animal**: Número que identifica al ratón.
- - **ID tumor**: L o R en función de si es el tumor en lado derecho (R) o izquierdo (L).
- - **Group**: grupo de tratamiento.
- - **DPV o TS**: medida que luego es usada para calcular el volumen. DPV si sólo se usan dos medidas o TS si se usan tres.
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- Estas columnas se pueden generar (ya llenas, excepto el grupo si no se usa la función de aleatorización) en la primera pestaña de Diseño.
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- Las columnas que siguen deben corresponder a los tiempos de medida (en verde).
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- ### Opciones de análisis
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- El panel que permite interaccionar con el análisis es el siguiente:
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- ![](images/invivo-2.jpg)
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- - **Hoja de análisis**: botón para subir el excel.
- - **Experimento de Vacunación**: indicar si es un experimento de vacunación (y entonces separa por ID de tumor) o si no lo es (todos los tumores son tratados igual).
- - **Filtrar estadística**: mostrar sólo la estadística significativa.
- - **Usar Incremento de Volumen**: si está activo, en las gráficas se muestra el incremento de volumen respecto a día 0 en vez del valor absoluto.
- - **Descargar Volúmenes**: botón para descargar un excel con los volúmenes calculadas en vez de las medidas individuales.
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- Una vez cargado el fichero de excel, aparece la siguiente opción dónde se puede indicar a partir de qué tamaño se considera fallecimiento del tumor (usado en las curvas de supervivencia).
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- ![](images/invivo-3.jpg)
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- ### Resultados de análisis
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- #### Ratones
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- Tabla dónde aparece en número de ratones por grupo en cada punto temporal.
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- ![](images/invivo-4.jpg)
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- #### Cinéticas
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- Figuras en las que se muestra el crecimiento de forma agrupada y también de forma individualizada (una línea por ratón).
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- ![](images/invivo-5.jpg)
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- #### Supervivencia
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- Curva de supervivencia dónde los ratones fallecidos son los que superan el valor especificado.
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- ![](images/invivo-6.jpg)
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- #### Estadística
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- Primero hay una caja dónde se construye un modelo para ver si hay diferencias a nivel de *Timepoints* y a nivel de grupos.
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- ![](images/invivo-7.jpg)
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- Seguida hay una tabla donde se compara en cada punto temporal los diferentes grupos mediante un Kruskal-Wallis y el dunn-test para las comparaciones individuales.
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- ## Exportar
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- Esta pestaña permite modificar el estilo de las figuras para optimizar su presentación.
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- En la barra de opciones encontramos:
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- - **Seleccionar figura**: qué figura queremos exportar. Se puede seleccionar entre "Cinética Grupo", "Cinética Individual" y "Survival".
- - **Ancho**: pixeles que ocupa la figura a nivel horizontal.
- - **Altura**: pixeles que ocupa la figura a nivel horizontal.
- - **Colors**: paleta de colores que sustituye la usada por defecto. Hay que introducir los códigos de los colores separados por una coma.
- - **Etiqueta Eje X**: etiqueta personalizada para el eje de las X.
- - **Etiqueta Eje Y**: etiqueta personalizada para el eje de las Y.
- - **% Ancho errorbars**: Anchura de las barras de error.
- - **Tamaño línea**: Grosor de las líneas de crecimiento.
- - **Tamaño puntos**: Tamaño de los puntos de volumen.
- - **Tamaño textos**:Tamaño de los textos.
- - **Escala logarítmica eje Y**: Si está activa, la escala se representa en escala logarítmica.
- - **Mostrar llegenda**: si se desactiva, no se representa la leyenda en la figura.
- - **Seleccionar Tema**: por defecto "BW", pero se puede seleccionar "Default" y "Classic".
- - **Exportar**: Botón que genera un archivo comprimido que contiene la figura en formato png y también en formato objeto de R por si se quiere modificar a posteriori.
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- #### Ejemplo:
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- Sin modificar:
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- ![](images/invivo-18.jpg)
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- Tras modificar el estilo:
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- ![](images/invivo-19.jpg)
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